一、核心技术原理与优势

1. 高分辨率分离核心逻辑

2. 技术优势

• 高柱效：采用 1.7-3.5μm 超纯球形硅胶填料，理论塔板数可达 10⁴-10⁵/m，较传统 5μm 填料柱效提升 30% 以上；

• 强选择性：丰富键合相（C18、C8、NH₂、HILIC 等）适配不同极性、分子量样品，减少峰重叠；

• 精准定量：峰形对称（拖尾因子 0.9-1.1）、批次间 RSD≤1.5%，确保定量结果偏差≤±2%；

• 宽适配性：兼容反相、正相、离子交换等模式，适配小分子、大分子及痕量杂质分析。

二、关键参数选型指南

1. 物理参数选型

• 柱长与内径：250-300mm 柱长适配 10-50 组分复杂样品，500-600mm 用于难分离体系；4.6mm 内径为常规选择，微径柱（1.0mm）适配 LC-MS/MS，溶剂消耗减少 80%；

• 填料粒径：1.7-3.5μm 用于高分辨率需求，5μm 平衡效率与柱压，大分子样品（如蛋白）需搭配 300A 大孔径填料；

• 颗粒与孔径：球形填料降低柱压、延长寿命，孔径需为分子直径 3 倍以上（小分子选 80-120A，大分子选 300A）。

2. 化学参数选型

• 基质类型：硅胶基质适配 pH 2-8 常规分析，特殊修饰硅胶可拓展至 pH 1-12；聚合物基质适合强酸碱体系与蛋白分离；

• 键合相与封端：C18/C8 适用于非极性 / 弱极性样品，NH₂/HILIC 适配极性化合物；高封端处理可减少峰拖尾，提升极性样品分离效果；

• 载碳量：高载碳量增强非极性化合物保留，低载碳量缩短分析时间。

三、典型应用场景方案

1. 生物医药领域（单抗 / 药物研发）

• 需求：分离单抗电荷异质性、糖基化修饰体，检测 0.1% 以下痕量杂质；

• 选型：1.8μm C18 微径柱（1.0×50mm）或 HILIC 色谱柱，高封端设计；

• 效果：LOQ 低至 0.1%，不同修饰体基线分离，满足生物药 GMP 合规要求。

2. 食品 / 农产品安全检测

• 需求：同时检测果蔬中多种农药残留（ng/mL 级），排除基质干扰；

• 选型：3.5μm C18 色谱柱（4.6×150mm），超纯硅胶基质；

• 效果：15 分钟内分离 20 + 种农药残留，回收率 90%-110%，符合国标 GB 2763 要求。

3. 环境污染物监测

• 需求：检测地表水中痕量 VOCs、多环芳烃，检出限达 μg/L 级；

• 选型：2.7μm 苯基键合相色谱柱，适配反相梯度洗脱；

• 效果：有效分离复杂基质中目标物，定量 RSD≤2%，满足 EPA 标准。

4. 代谢组学 / 脂质组学研究

• 需求：分离血浆中极性代谢物或磷脂类化合物，捕获微弱特征峰；

• 选型：HILIC 色谱柱（极性代谢物）或专用脂质分析柱，1.7μm 填料；

• 效果：特征峰信号增强，分离度≥1.7，支持多组分同时定性定量。

四、操作优化与维护要点

1. 操作优化技巧

• 梯度条件：复杂样品采用慢梯度洗脱（斜率 5%-10%/min），避免峰重叠；

• 流动相选择：反相体系常用甲醇 - 水 / 乙腈 - 水，添加 0.1% 甲酸改善峰形；

• 柱温控制：设置 30-40℃恒定柱温，减少温度波动对保留时间的影响。

2. 维护规范

• 样品预处理：通过滤膜（0.45μm）过滤去除颗粒物，避免堵塞色谱柱；

• 日常冲洗：实验前后用甲醇 / 乙腈冲洗柱体，避免缓冲盐残留；

• 定期校准：每 3 个月用标准品验证柱效，理论塔板数下降超 30% 时需更换；

• 储存条件：短期用甲醇 / 乙腈（1:1）封存，长期存放于 4℃阴凉处。

五、应用价值